Pauline Werner absolvierte ihr Schauspielstudium von 2016 bis 2020 an der Otto-Falckenberg-Schule in München, nachdem sie 2015 ihr Abitur an der Staatliche Ballettschule und Schule für Artistik Berlin abgelegt hatte. Bereits während des Studiums spielte sie an den Münchner Kammerspielen. Von 2020 bis 2022 war sie Ensemblemitglied am Theater Konstanz. Weitere Engagements führten sie u.a. an das Theater Lüneburg und das Staatstheater Braunschweig.

Vor der Kamera war sie in Produktionen wie „Sisi“, „Tatort München – Unklare Lage“, „Der Passau Krimi“ und dem Kinofilm „Letzter Abend“ zu sehen. 2019 wurde sie für den Kurzfilm „I Can Do It“ als Best Supporting Actress (FICOCC) ausgezeichnet und erhielt 2018 ein Stipendium des Deutschen Bühnenvereins sowie das Gabriele-Oemisch-Stipendium.

Darüber hinaus absolvierte sie Weiterbildungen in den Bereichen Synchron, Tanz und im Andersson-System. Während eines Auslandsaufenthalts in New York vertiefte sie ihre Kenntnisse durch Accent Training, Gesangscoaching und Tanzunterricht. 2025 setzte sie ihren Schwerpunk auf Regie, Kamera und Drehbuch an einer kanadischen Filmschule wirkte in unterschiedlichen Funktionen an mehreren Kurzfilmen mit und realisierte zudem ein eigenes Projekt. Neben ihrer Tätigkeit als Schauspielerin ist sie gelegentlich als Sprecherin aktiv.

In der Spielzeit 25|26 zu sehen in

• „Löwenherzen“